细胞购买常见问题汇总
200 人阅读发布时间:2024-08-19 10:18
一、收到细胞前应该做哪些准备?
客户应具有一定细胞培养知识与经验,并具备基本实验设备,如细胞培养实验室、无菌操作台、CO2培养箱,倒置显微镜等;还应准备好相应的无菌培养基、血清、双抗、细胞培养瓶、培养板等。
二、细胞发货标准是什么?规格、数量是多少?
细胞发货时,保证细胞处于生长对数期;贴壁细胞达到75%以上汇合度,约5×105cells/T25细胞培养瓶;传代次数5代以内;冻存细胞发2个冻存管;无微生物污染。
三、细胞以什么形式运输?
细胞通常用T25细胞培养瓶培养,发货时用相应的完全培养基灌满细胞瓶,密封瓶口后放在包装盒内,以快递的方式发送给客户。天气变冷,最低温低于4℃时,以冻存细胞,干冰运输的方式发货。
四、收到细胞后如何操作?
- 首先,观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有,请及时与技术支持联系。
- 用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于细胞培养箱内静置培养,隔天再取出进行观察。
- 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
- 可将培养瓶内多余的培养基转移至50ml无菌离心管中,备用;细胞传代时,可以将该培养基按照一定比例和客户自备的培养基混合使用,让细胞逐渐适应培养条件。
- 确认细胞状态良好后,应及时将细胞冻存,再进行后续的实验,避免后期实验失误可能发生细胞污染或死亡而导致的细胞丢失。
- 建议客户收到细胞后前3天,100×、200×、400×各拍3-5张细胞照片,记录细胞状态,便于和技术支持沟通交流。
五、是否可以更换细胞培养基?
不建议替换。每株细胞均有其特定使用且已适应的培养基,而且经过一定时间驯化后,若骤然改变培养条件,细胞有可能出现不适应,表现出生长缓慢、颗粒增多、死细胞出现,造成细胞无法存活;也有些细胞在更换培养基后也能正常的生长,细胞状态也能维持,但问题会出现在冻存后期的复苏过程,有可能细胞没法复苏,所以不建议随便更换培养基。