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技术资料/正文
87 人阅读发布时间:2026-09-18 11:00
1. 采血与抗凝
血源选择:必须使用 SPF级(无特定病原体) 或确认无禽流感、新城疫等抗体的健康公鸡。
抗凝处理:无菌采集鸡血,立即与等体积的 阿氏液(Alsever's Solution) 混合,轻轻颠倒混匀,防止凝固。
2. 洗涤红细胞
此步骤旨在去除血浆、白细胞及抗凝剂,是保证悬液纯净的关键。将抗凝血转移至离心管,用无菌PBS(pH 7.2-7.4)或生理盐水重悬。
离心:以 1500-2000 rpm 离心 5-10分钟。
弃上清:小心吸弃上清液及管壁的 白细胞层,切勿扰动底部的红细胞沉淀。
重复洗涤:加入PBS重悬红细胞,重复上述离心和弃上清步骤,至少洗涤3次。
终点判断:直至最后一次离心的上清液 完全透明无色,表明血浆和白细胞已洗净。
3. 配制1%悬液
末次离心后,弃尽上清,获得 压积红细胞(PCV)。按 1:99 的体积比配制:吸取 1份 压积红细胞,加入 99份 无菌PBS或生理盐水。
例如:取1 mL压积红细胞,加入99 mL PBS。轻轻颠倒或吹打混匀,避免剧烈震荡导致溶血。